2022主管中藥師藥理學考點精講：中藥有效成份的分離方法

2022主管中藥師藥理學考點精講：中藥有效成份的分離方法

(一)溶劑法

1.酸堿溶劑法

堿性成分：如生物堿可與無機酸成鹽溶于水，借此可與非堿性難溶于水的成分分離。

酸性成分：含羧基或酚羥基的酸性成分，難溶于酸水可與堿成鹽而溶于水。

內酯或內酰胺結構成分：可被皂化溶于水，借此與其他難溶于水的成分分離。

(使用注意：酸性或堿性的強度、與被分離成分接觸的時間、加熱溫度和時間等，避免在劇烈反應，某些化合物結構發生變化或結構不能恢復到原存于中藥中的狀態。)

2.溶劑分配法

原理：利用混合物中各成分在兩相溶劑中分配系數不同而達到分離的方法。

(二)沉淀法

1.專屬試劑沉淀法

雷氏銨鹽→生物堿。

膽甾醇→甾體皂苷。

明膠→鞣質。

2.分級沉淀法

在混合組分的溶液中加入與該溶液能互溶的溶劑，改變混合組分溶液中某些成分的溶解度，使其從溶液中析出。如：

(1)含有糖類或蛋白質的水溶液中，分次加入乙醇，使含醇量逐步增高，逐級沉淀出分子量段由大到小的蛋白質、多糖、多肽等;

(2)在含皂苷的乙醇溶液中分次加入乙醚或乙醚-丙酮混合液可使極性有差異的皂苷逐段沉淀出來。

3.鹽析法

在混合物水溶液中加入易溶于水的無機鹽(最常用的是氯化鈉)至一定濃度或飽和狀態，使某些中藥成分在水中溶解度降低而析出，或用有機溶劑萃取出來。如從三顆針中分離小檗堿。

(三)結晶法

原理：利用混合物中各成分在溶劑中的溶解度不同達到分離的方法。

溶劑的要求：對被溶解成分的溶解度隨溫度不同應有顯著差別;與被結晶的成分不應產生化學反應;沸點適中等。

常用于結晶的溶劑：甲醇、乙醇、丙酮、乙酸乙酯、乙酸、吡啶等。(單用或混用)。

(四)膜分離法

利用天然或人工合成的高 分子膜，以外加壓力或化學位差為推動力，對混合物溶液中的化學成分進行分離、分級、提純和富集。

原理：利用分子大小不同進行分離。

四大膜分離技術：反滲透、超濾、微濾、電滲析。

(五)色譜法

1.吸附色譜

原理：利用吸附劑對被分離化合物分子的吸附能力的差異，而實現分離的一類色譜。

常用的吸附劑包括硅膠、氧化鋁、活性炭、聚酰胺等。

色譜方式通常為薄層色譜和柱色譜。

2.凝膠過濾色譜(排阻色譜、分子篩色譜)

原理：分子篩作用。根據凝膠的孔徑和被分離化合物分子的大小不同而達到分離的目的。

常用的凝膠：葡聚糖凝膠(親水性)和羥丙基葡聚糖凝膠(親水性、親脂性)。

3.分配色譜

原理：利用被分離成分在固定相和流動相之間的分配系數的不同而達到分離。

正相：流動相的極性小于固定相極性。常用的固定相有氰基與氨基鍵合相。主要用于分離極性及中等極性的分子型物質。

反相：流動相的極性大于固定相極性。常用的固定相有十八烷基硅烷(ODS)或C8鍵合相。主要用于分離非極性及中等極性的各類分子型化合物。

4.大孔樹脂色譜

原理：(1)選擇性吸附;(2)分子篩性能。

大孔樹脂的色譜行為具有反相的性質。被分離物質的極性越大，其Rf值越大，反之Rf值越小。對洗脫劑而言，極性大的溶劑洗脫能力弱，而極性小的溶劑則洗脫能力強，故大孔樹脂在水中的吸附性強。實際工作中，常先將欲分離的混合物的水溶液通過大孔樹脂柱后，依次用水、濃度由低到高的含水甲(乙)醇溶液、甲(乙)醇洗脫，可將混合物分離成若干組分。

優點：選擇性好、機械強度高、再生處理方便、吸附速度快等。

5.離子交換色譜

原理：基于混合物中各成分解離度差異進行分離。

離子交換樹脂對交換化合物的能力強弱，主要取決于化合物解離度的大小，帶電荷的多少等因素?；�合物解離度大(酸性、堿性強)易交換在樹脂上，相對來說難洗脫。

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